致痙攣性殺鼠劑主要包括氟乙酰胺、氟乙酸鈉、甘氟、毒鼠強、殺鼠硅（毒鼠硅）。急性致痙攣性殺鼠劑中毒是短期內(nèi)接觸致痙攣性殺鼠劑后引起的以**神經(jīng)系統(tǒng)損害為主的全身性**。
1 概述
致痙攣性殺鼠劑多數(shù)為白色粉末或結(jié)晶，但不同毒物在水和有機溶劑中的溶解度差異很大，化學(xué)性質(zhì)大多較為穩(wěn)定，大部分有造成二次中毒的危險。致痙攣性殺鼠劑均為高毒或劇毒化學(xué)物，對大鼠的經(jīng)口LD50大多小于 5mg/kg（附件 1）。致痙攣性殺鼠劑中毒途徑主要為經(jīng)口攝入，絕大多數(shù)為食源性中毒，如食用致痙攣性殺鼠劑污染的食品和飲用水。
2 中毒事件的調(diào)查和處理
2.1 現(xiàn)場處置人員的個體防護
現(xiàn)場調(diào)查人員進入殺鼠劑生產(chǎn)、儲存現(xiàn)場調(diào)查時，應(yīng)佩戴防顆粒物口罩，乳膠或化學(xué)防護手套和防護眼罩，防護服無特殊要求。進行食品加工、儲存現(xiàn)場調(diào)查時，應(yīng)佩戴乳膠或化學(xué)防護手套，防護服無特殊要求。
現(xiàn)場采樣人員采集食品樣品時，應(yīng)佩戴防顆粒物口罩，乳膠或化學(xué)防護手套和防護眼罩，防護服無特殊要求。醫(yī)療救護人員在救護中毒病人時，一般不必穿戴防護裝備。
2.2 中毒事件的調(diào)查
調(diào)查人員到達中毒現(xiàn)場后，應(yīng)先了解中毒事件的概況，然后進行中毒事件相關(guān)場所、人員等調(diào)查工作，并及時向中毒事件指揮部提出收集并封存所有可疑中毒食品、其他可能導(dǎo)致本次中毒事件物品以及中毒病人嘔吐物、血液、尿液和其他救治病人的醫(yī)療廢棄物的建議。
2.2.1 中毒事件相關(guān)場所的調(diào)查
生活性中毒事件的調(diào)查對象包括中毒事件涉及的食品生產(chǎn)、加工至食用整個過程的各個場所，調(diào)查內(nèi)容包括食品加工過程（包括使用的原料和配料、調(diào)料、食品容器、使用的工具），食品的分裝、儲存的條件等。生產(chǎn)性中毒事件的調(diào)查對象主要為生產(chǎn)、儲存場所，調(diào)查內(nèi)容包括生產(chǎn)工藝流程、環(huán)境狀況、通風(fēng)措施、防護條件、人員接觸情況等。
2.2.2 中毒事件相關(guān)人員的調(diào)查
調(diào)查對象應(yīng)包括中毒病人、目擊證人以及其他相關(guān)人員（如飯店負(fù)責(zé)人、廚師、服務(wù)員、食品采購員、同工作場所工人等）。調(diào)查內(nèi)容包括接觸時間、接觸物質(zhì)、接觸人數(shù)、中毒人數(shù)、中毒的主要癥狀、中毒事件的進展情況、已經(jīng)采取的緊急措施、飲食的加工方法、食品的來源等。同時，還應(yīng)向臨床救治單位進一步了解相關(guān)資料（如搶救過程、臨床**資料、實驗室檢查結(jié)果等）。
2.2.3 現(xiàn)場周圍環(huán)境和生活習(xí)慣的調(diào)查
如某一地區(qū)反復(fù)出現(xiàn)此類事件，則調(diào)查內(nèi)容還應(yīng)包括現(xiàn)場周圍是否同時有動物大量死亡，動物死前的癥狀表現(xiàn)，現(xiàn)場周圍鼠藥使用情況（包括鼠藥的種類、投放時間和數(shù)量、儲存等），居民的生產(chǎn)、生活習(xí)慣（如飲水、飲食等）。對現(xiàn)場調(diào)查的資料作好記錄，進行現(xiàn)場拍照、錄音等。取證材料要有被調(diào)查人的簽字。
2.3 現(xiàn)場中毒樣品的快速檢測
中毒事件現(xiàn)場采集的可疑中毒食品、水、毒餌、鼠藥以及中毒病人的嘔吐物等樣品可在現(xiàn)場進行快速定性檢測?？紤]毒鼠強中毒時，
可使用硫酸-變色酸目視比色法定性測定（附件 2），有條件可使用硫酸-變色酸分光光度比色法定量測定（附件 3）；考慮氟乙酰胺中毒時，可使用改良奈氏試劑法（附件 4）或異羥肟酸鐵反應(yīng)法（附件 5）測定。
2.4中毒事件的確認(rèn)和鑒別
2.4.1 中毒事件的確認(rèn)標(biāo)準(zhǔn)
同時具有以下三點，可確認(rèn)為急性致痙攣性殺鼠劑中毒事件：
a)中毒病人有致痙攣性殺鼠劑接觸機會；
b)中毒病人短時間內(nèi)出現(xiàn)以癲癇樣大發(fā)作等**神經(jīng)系統(tǒng)興奮為主的臨床表現(xiàn)；
c)血、嘔吐物和食物等樣品中檢出致痙攣性殺鼠劑。
2.4.2 中毒事件的鑒別
應(yīng)注意與乙型腦炎、流行性腦脊髓膜炎等傳染病疫情、群體性癔病以及其它毒物中毒事件（如霉變甘蔗中毒、有機氯殺蟲劑中毒等）鑒別。
2.5現(xiàn)場醫(yī)療救援
現(xiàn)場醫(yī)療救援首要措施是迅速控制中毒病人的抽搐發(fā)作，并保持呼吸道通暢。意識清晰的中毒病人應(yīng)立即進行催吐，有條件可給予活性炭（**用量為 50g，兒童用量為 1g/kg）口服。當(dāng)出現(xiàn)大批中毒病人，應(yīng)首**行現(xiàn)場檢傷分類，優(yōu)先處理紅標(biāo)病人。
2.5.1 現(xiàn)場檢傷分類
a)紅標(biāo)，具有下列指標(biāo)之一者：昏迷；持續(xù)抽搐；窒息。
b)黃標(biāo)，具有下列指標(biāo)者：抽搐。
c)綠標(biāo)，具有下列指標(biāo)者：
出現(xiàn)**、頭暈、乏力、惡心、嘔吐等癥狀。
d)黑標(biāo)，同時具備下列指標(biāo)者：
意識喪失，瞳孔散大，無自主呼吸，大動脈搏動消失。
2.5.2 現(xiàn)場醫(yī)療救援
對于紅標(biāo)病人要保持復(fù)蘇體位，立即建立靜脈通道，抽搐發(fā)作者，立即緩慢靜脈注射***或****，必要時可聯(lián)合應(yīng)用****鈉。黃標(biāo)病人應(yīng)密切觀察病情變化。出現(xiàn)呼吸節(jié)律明顯不規(guī)律、窒息或嚴(yán)重缺氧等情況時，及時采取對癥支持措施。綠標(biāo)病人脫離環(huán)境后，暫不予特殊處理，觀察病情變化。
2.5.3 病人轉(zhuǎn)送
中毒病人經(jīng)現(xiàn)場急救處理后，應(yīng)立即就近轉(zhuǎn)送至有血液凈化條件的醫(yī)院繼續(xù)觀察和**。
3 中毒樣品的采集與檢測
3.1 采集樣品的選擇
可能導(dǎo)致中毒的食品、中毒病人的嘔吐物、胃內(nèi)容物和血液是**樣品。另外，可根據(jù)中毒事件的現(xiàn)場調(diào)查結(jié)果，確定應(yīng)采集的其它樣品種類。
3.2 樣品的采集方法
嘔吐物、胃內(nèi)容物、固體食品和半流質(zhì)食品使用具塞玻璃瓶或聚
乙烯瓶密閉盛放，采樣量 50g～100g；液體樣品(血液除外)使用具塞玻璃瓶或聚乙烯瓶盛放，采樣量 300ml～500ml；血液樣品使用具塞的抗凝試管盛放，采血量應(yīng)大于 10ml。如果測定血漿中的毒鼠強，血液樣品采集后立即用 3000rpm/min 離心，移取上層血漿。
3.3 樣品的保存和運輸
所有樣品采集后*好在 4℃條件下冷藏保存和運輸，如無條件冷藏保存運輸，樣品應(yīng)在采集后 24h 內(nèi)進行實驗室檢測。所有實驗室檢測
完畢的樣品，應(yīng)在冷凍條件下保存一周，以準(zhǔn)備實驗室復(fù)核。
3.4推薦的實驗室檢測方法
a) 中毒樣品的毒鼠強測定可使用氣相色譜法定性及定量分析（GA/T 205-1999）。
b)血漿中毒鼠強可使用液液萃取/氣相色譜氮磷檢測器法定量測定（附件 6）
c)食品和生物樣品中氟乙酰胺和毒鼠強的同時測定可使用液液萃取/氣相色譜氮磷檢測器法定量分析（附件 7）。
4 醫(yī)院內(nèi)救治
4.1 病人交接
中毒病人送到醫(yī)院后，由接收醫(yī)院的接診醫(yī)護人員與轉(zhuǎn)送人員對中毒病人的相關(guān)信息進行交接，并簽字確認(rèn)。
4.2 診斷和診斷分級
救治醫(yī)生對中毒病人或陪護人員進行病史詢問，對中毒病人進行體格檢查和實驗室檢查，確認(rèn)中毒病人的診斷，并進行診斷分級。
診斷分級
a) 觀察對象
有致痙攣性殺鼠劑接觸機會，而無臨床癥狀者。
b)輕度中毒：
出現(xiàn)**、頭暈、惡心、嘔吐、四肢無力等癥狀，可有局灶性癲癇樣發(fā)作；
c)中度中毒：在輕度中毒基礎(chǔ)上，具有下列之一者：
i 癲癇樣大發(fā)作；
ii 精神病樣癥狀，如幻覺、妄想等。
d) 重度中毒：在中度中毒基礎(chǔ)上，具有下列之一者：
i 癲癇持續(xù)狀態(tài)；
ii 合并其他臟器功能衰竭。
4.3**
接收醫(yī)院對所接收的中毒病人確認(rèn)診斷和進行診斷分級后，根據(jù)病情的嚴(yán)重程度將病人送往不同科室進行進一步救治。觀察對象進行至少 24h～48h 醫(yī)學(xué)觀察，輕、中度中毒病人住院**，重度中毒病人立即進行監(jiān)護搶救**。
4.3.1 **體內(nèi)毒物
a)催吐：對于意識清晰、經(jīng)口中毒早期者，可進行催吐。
b)洗胃：對經(jīng)口中毒不足 24h 的病人均要進行洗胃。中、重度中毒的病人洗胃后要保留洗胃管，以備反復(fù)灌入活性炭。
c)活性炭：輕度中毒病人洗胃后給予活性炭 1 次，中、重度中毒病人可反復(fù)使用，使用劑量一般為**每次 30g～50g，兒童每次 1g/kg。
d)血液凈化：氟乙酰胺、氟乙酸鈉和甘氟中毒一般選用血液透析**，毒鼠強中毒需使用血液灌流進行**。中、重度中毒病人在保證生命體征平穩(wěn)的情況下，應(yīng)早期進行血液凈化**，可多次進行。
4.3.2 **止痙
a) ****鈉：為基礎(chǔ)用藥，可與其他**止痙**合用。輕度中毒，每次 0.1g，每 8h1 次，肌內(nèi)注射；中、重度中毒，每次 0.1g～0.2g，每 6h～8h 時 1 次，肌內(nèi)注射。兒童每次 2mg/kg。抽搐停止后減量使用 3～7 天。
b) ***：癲癇大發(fā)作和癲癇持續(xù)狀態(tài)的****。**每次10mg～20mg，兒童每次 0.3mg/kg～0.5mg/kg，緩慢靜脈注射，注射速度**不大于 5mg/min，兒童不大于 2 mg/min。必要時可重復(fù)靜脈注射。
c) 其他：癲癇持續(xù)狀態(tài)超過 30min，連續(xù)兩次使用***，抽搐仍不能得到有效控制，應(yīng)及時使用靜脈麻醉劑。
4.3.3 特效****
乙酰胺為氟乙酰胺、氟乙酸鈉和甘氟中毒的特效**劑，需早期、
足量應(yīng)用。輕、中度中毒病人每次 2.5g～5.0g，肌內(nèi)注射，每日 2～4次，連用 5～7 日；重度中毒病人一次可給予 5.0g～10.0g。
4.3.4 其他對癥支持**
加強營養(yǎng)、合理膳食，注意水、電解質(zhì)及酸堿平衡，密切監(jiān)護心、腦、肝、腎等重要臟器功能，及時給予相應(yīng)的**措施。
5 應(yīng)急反應(yīng)的終止
中毒食品和其他可疑毒物已經(jīng)完全收繳和銷毀，中毒相關(guān)危險因素已被有效控制，未出現(xiàn)新的中毒病人且原有病人病情穩(wěn)定 24h 以上。
附件 1:
致痙攣性殺鼠劑的理化性質(zhì)和毒性
毒性人*低致死
毒物名稱分子式物理特性化學(xué)性質(zhì)備注
CAS動途LD50
劑量
物徑 （mg/kg）
毒鼠強80-12-6C4H8N4O2S2無味的白色晶體或粉末，難溶于甲化學(xué)性質(zhì)非常大經(jīng)0.1～0.35mg～10mg可引起二次中毒
醇、乙醇和水，微溶于氯仿和丙酮， 穩(wěn)定，在稀酸 鼠口
可溶于乙酸乙酯和苯，易溶于二甲或稀堿中不分
基亞砜。解。
氟乙酰胺640-19-7C2H4OFN白色針狀結(jié)晶，無臭無味，易溶于常溫下化學(xué)性大經(jīng)5.75 mg/kg可造成二次中
水、乙醇、丙酮，微溶于氯仿。空質(zhì)較為穩(wěn)定。鼠口毒。
氣中易潮解，熔點 107℃～108℃。
氟乙酸鈉62-74-8FCH2COONa白色晶體，略帶醋酸氣味，極易溶常溫下化學(xué)性大經(jīng)0.15 mg/kg可引起二次中毒
于水，微溶于丙酮、乙醇。在空氣質(zhì)較為穩(wěn)定， 鼠口
中易潮解成糖漿狀。但高于 200 ℃
可以分解。
毒鼠硅29025-67-0C12H16O3NClSi白色結(jié)晶或粉末，無臭、味苦，難遇酸易分解大經(jīng)1～4
溶于水，可溶于苯和氯仿等多種有鼠口
機溶劑。熔點 230℃～235℃。
甘氟80650-71-2C3H6OF2占無色或微黃色透明油狀液體，具有化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定大經(jīng)30可引起二次中
70%～80%，揮發(fā)性，略帶酸味，能與水、醇、鼠口毒。
C3H6OFCl占乙醚混溶。經(jīng) 66
20%～30%皮
附件 2
硫酸-變色酸定性測定食品、嘔吐物等樣品中毒鼠強
1 適用范圍
本方法適用于食品、水、毒餌、鼠藥、嘔吐物等樣品中毒鼠強的定性分析。環(huán)境樣本和生物樣本中毒鼠強的定性測定可作為初步判斷事件性質(zhì)的重要參考，不能作為確定事件性質(zhì)的依據(jù)。重大突發(fā)事件性質(zhì)的判定，建議采用其他分析方法加以確證。
2 原理
毒鼠強在強酸條件下加熱可分解，其分解產(chǎn)物中的甲醛在酸性條件下與變色酸發(fā)生變色反應(yīng)，通過顏色變化對毒鼠強進行定性分析。
3 方法重要參數(shù)
3.1檢出限：0.5μg/5ml
3.2干擾：醛類等對其可造成假陽性干擾，酚類可降低其靈敏度。醬油、醋、有顏色的飲料等液體樣品在乙酸乙酯或苯萃取后使用少量活性炭進行脫色處理，以防止顏色干擾。
3.4 全程測定時間：20min。
4 試劑和儀器
4.1儀器：酒精燈 1 個（電熱杯或控溫電爐）、試管若干、500ml 燒
杯 1 個、100ml 燒杯 2 個、漏斗或滴管 1 個、玻璃棒 1 個、濾紙若干。
4.2試劑：乙酸乙酯、60%濃硫酸，變色酸。
5 操作步驟
5.1 樣品前處理
由于現(xiàn)場所采集的樣品成分復(fù)雜，除少數(shù)樣品，例如市售鼠藥或工業(yè)原粉，可直接用本方法檢測外，其他樣品均需進行樣品前處理以去除雜質(zhì)干擾，提高靈敏度和降低假陽性率。
5.1.1 鼠藥和工業(yè)原粉
直接取少量 0.1g～0.5g 進行檢測。
5.1.2 固體樣品（毒餌、米、面、茶葉、鹽、嘔吐物等）
取固體樣品（顆粒大的固體需先研磨碎）1g～3g 放入燒杯中，加入乙酸乙酯（苯或丙酮亦可）5ml，玻璃棒充分?jǐn)噭?，靜置 5min，將上清液用濾紙過濾，重復(fù)上述過程一次，合并上清液至一大試管內(nèi)，將試管置于沸水浴中，使提取液完全揮發(fā)。
注意：不要將已經(jīng)揮發(fā)干的試管長時間置于沸水浴中，否則會影響回收率，出現(xiàn)假陰性。
5.1.3 液體樣品（水、酒、飲料、醬油、醋等）
取液體樣品 1ml～3ml 放入大試管中，加入乙酸乙酯 5ml，充分振蕩混勻，靜置 5min，用分液漏斗或滴管分離上清液，重復(fù)過程一次，合并上清液至大試管內(nèi)，將試管置于沸水浴中，使提取液完全揮發(fā)。醬油、醋、有顏色的飲料等液體樣品在乙酸乙酯萃取后使用少量活性炭（聚酰胺粉或硅藻土亦可）進行脫色處理，以防止顏色干擾。
5.2 定性分析
向經(jīng)前處理后的樣品試管中加入 2%變色酸 0.2ml，加 60%硫酸5.0ml，放置 100℃水浴，反應(yīng) 5min 觀察顏色變化。同時取一干凈的空試管進行同樣操作作為對照。
6 質(zhì)量控制
檢測時，應(yīng)同時加做陰性樣品及毒鼠強標(biāo)準(zhǔn)品。
0結(jié)果報告和解釋定性分析陽性：試管內(nèi)顏色呈現(xiàn)淡紫色至紫黑色。
陰性：試管內(nèi)顏色為淡黃色。
附件 3
硫酸-變色酸分光光度比色法定量測定食品等樣品中毒鼠強
1 適用范圍
本方法適用于食品、毒餌、水、嘔吐物等樣品中毒鼠強濃度的定量分析。環(huán)境樣本以及生物樣本中毒鼠強的測定可作為初步判斷事件性質(zhì)的重要參考。重大突發(fā)事件性質(zhì)的判定，建議采用其他分析方法加以確證。
2 原理
毒鼠強在強酸條件下加熱可分解，其分解產(chǎn)物中的甲醛在酸性條件下與變色酸發(fā)生變色反應(yīng)，比色定量。
3 方法重要參數(shù)
3.1線性范圍：（0.5～10）μg/5.0ml。
3.2**度（RSD）：≤10%。
3.3準(zhǔn)確度（回收率）：90%～105%。
3.4檢出限：0.5μg/5.0ml。
3.5干擾：醛類等對其可造成假陽性干擾，酚類可降低其靈敏度。
3.6全程測定時間：30min。
4 試劑和儀器
4.1.儀器：酒精燈 1 個（電熱杯或控溫電爐）、分光光度計、試管若
干、500ml 燒杯 1 個、100ml 燒杯 2 個、漏斗或滴管 1 個、玻璃棒 1
個、濾紙若干。
4.2 試劑：乙酸乙酯、60%濃硫酸，變色酸顯色劑。毒鼠強標(biāo)準(zhǔn)品從公安部門獲得。
5 操作步驟
5.1 樣品前處理
由于現(xiàn)場所采集的樣品成分復(fù)雜，除少數(shù)樣品，例如市售鼠藥或工業(yè)原粉，可直接用本方法檢測外，其他樣品均需進行樣品前處理以去除雜質(zhì)干擾，提高靈敏度和降低假陽性率。
5.1.1 鼠藥和工業(yè)原粉
直接取少量 0.1g～0.5g 進行檢測。
5.1.2 固體樣品（毒餌、米、面、茶葉、鹽、嘔吐物等）
取固體樣品（顆粒大的固體需先研磨碎）1g～3g 放入燒杯中，向燒杯中加入乙酸乙酯（苯或丙酮亦可）5ml，玻璃棒充分?jǐn)噭?，靜置 5min，將上清液用濾紙過濾，重復(fù)上述過程一次，合并上清液至一大試管內(nèi)，將試管置于沸水浴中，使提取液完全揮發(fā)。
注意：不要將已經(jīng)揮發(fā)干的試管長時間置于沸水浴中，否則會影響回收率，出現(xiàn)假陰性。
5.1.3 液體樣品（水、酒、飲料、醬油、醋等）
取液體樣品 1ml～3ml 放入大試管中，加入乙酸乙酯 5ml，充分振蕩混勻，靜置 5min，用分液漏斗或滴管分離上清液，重復(fù)過程一次，合并上清液至大試管內(nèi)，將試管置于沸水浴中，使提取液完全揮發(fā)。醬油、醋、有顏色的飲料等液體樣品在乙酸乙酯萃取后使用少量活性炭（聚酰胺粉或硅藻土亦可）進行脫色處理，以防止顏色干擾。
5.2 定量分析
5.2.1 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線吸取相當(dāng)于 0μg、0.1μg、0.2μg、0.3μg、0.4μg、0.5μg的標(biāo)準(zhǔn)物加入 2%變色酸 0.2ml，加 60%硫酸 5.0ml，放置 100℃水浴10min 后以 1cm 比色皿在 573nm 波長處比色。
5.2.2. 樣品分析
用測定標(biāo)準(zhǔn)系列的操作條件測定樣品溶液和空白對照溶液。樣品吸光度減去空白對照吸光度后，由標(biāo)準(zhǔn)曲線得出毒鼠強含量。
5.2.3 計算
根據(jù)取樣量 M(g)及樣品中毒鼠強含量 C(μg)按下式計算樣品含量。樣品含量(μg/kg)=[C/M]×1000
6 質(zhì)量控制
檢測時，應(yīng)同時加做陰性樣品。
附件 4
改良奈氏試劑法定性測定食品、生物樣品中氟乙酰胺
1 適用范圍
適用于環(huán)境樣品及部分生物樣品(嘔吐物和胃液和胃容物)中氟乙酰胺的定性測定，測定結(jié)果可作為初步判斷事件性質(zhì)的重要參考，不能作為確定事件性質(zhì)的依據(jù)。氟乙酰胺的檢測目前無國家標(biāo)準(zhǔn)分析方法，重大突發(fā)事件性質(zhì)的判定，建議采用其他分析方法加以確證。
2 原理
氟乙酰胺水溶液遇到強堿性的奈氏試劑,逐漸水解出氨,與奈氏試劑作用,產(chǎn)生黃棕色沉淀。
3 方法重要參數(shù)
3.1檢出限：0.5μg。
3.2干擾：銨鹽存在假陽性干擾。
3.3全程測定時間：20min。
4 器材與試劑
4.1試劑奈氏試劑:11.5g碘化汞和8g碘化鉀溶于少量水中,溶后加水稀釋至50ml,再加入25%氫氧化鈉50ml ,靜置過夜,取上清液使用,貯于棕色瓶中。
4.2陽性對照樣品：5ml胃液中加50μg氟乙酰胺。
4.3陰性對照樣品：5ml胃液中加50μg溴鼠隆。0測定
5.1樣品處理
固體或半固體(胃內(nèi)容物、嘔吐物)樣品,可采用有機溶劑直接提取法。一般常用甲醇或乙醇浸泡,在50℃水浴上溫浸1h～2h。如用其他有機溶劑(乙酸乙酯、氯仿等)時,可在提取容器中充分振搖,然后過濾,濾液置60℃水浴上蒸發(fā)至近干,用適量甲醇溶解殘渣(混濁時可過濾),溶液供檢驗用;液體樣品(飲水、菜湯、飲料),可直接用氯仿等有機溶劑提取或用透析法處理,也可采用在水浴上蒸去水分后再用甲醇浸出。
5.2測定
取處理后的樣品水溶液1ml～2ml ,加奈氏試劑1ml～2ml ,如有氟乙酰胺,在滴加試劑約0.5min，觀察顏色變化。如測定環(huán)境樣品氟乙酰胺時同時與氟乙酰胺標(biāo)準(zhǔn)和水質(zhì)等作對照。如測定胃液和胃容物中氟乙酰胺時，同時與陽性樣品和陰性樣品對照。
6 結(jié)果判定
陽性：淡黃色→黃色→亮黃色→深黃色，2min 后逐漸混濁，*后生成桔紅色沉淀。
陰性：無顏色反應(yīng)。
7 說明
7.1如有銨鹽存在，滴加試劑后立即生成桔紅色沉淀。
7.2對含量低的或含量高的樣品要用幾種檢驗方法來確證，以避免假陽性和假陰性，同時要以氟乙酰胺標(biāo)準(zhǔn)和水質(zhì)等作對照試驗，以便檢查操作是否準(zhǔn)確。
7.3樣品分離提取后，得到的毒物數(shù)量往往很少，而且常常又不能重復(fù)采樣，為此，在試驗前以消耗少量的樣品進行預(yù)試驗后，再進行確證試驗。
附件 5
異羥肟酸鐵反應(yīng)法定性測定食品等樣品中氟乙酰胺
1 適用范圍
本方法適用于食品、毒餌、水、嘔吐物樣品，可作為初步判斷事件性質(zhì)的重要參考，不能作為確定事件性質(zhì)的依據(jù)。氟乙酰胺的檢測目前無國家標(biāo)準(zhǔn)分析方法，重大突發(fā)事件性質(zhì)的判定，建議采用其他分析方法加以確證。
2 原理
氟乙酰胺與羥胺在堿性條件下，生成異羥肟酸，與三價鐵離子作用發(fā)生變色反應(yīng)，通過顏色變化對氟乙酰胺進行定性。
3方法重要參數(shù)
3.1檢出限：50μg/ml。
3.2干擾：堿度過高對其可造成假陽性干擾，酸度過高可造成假陰性干擾。
3.3全程測定時間：15min。
4 試劑和儀器
4.1 儀器：酒精燈 1 個（或電熱杯 1 個）、試管若干、500ml 燒杯 1個、100ml 燒杯 2 個、漏斗或滴管 1 個、玻璃棒 1 個、濾紙若干，PH 試紙。
4.2試劑：活性炭或中性氧化鋁、氫氧化鈉溶液，鹽酸羥胺溶液、鹽酸溶液、三氯化鐵。
4.3氟乙酰胺標(biāo)準(zhǔn)品從公安部門獲得。
5 樣品前處理
由于現(xiàn)場所采集的樣品成分復(fù)雜，除少數(shù)樣品，例如市售鼠藥或工業(yè)原粉，可直接用本方法檢測外，其他樣品均需進行樣品前處理來以去除雜質(zhì)干擾，提高靈敏度和降低假陽性率。
5.1 鼠藥和工業(yè)原粉
直接取少量 0.1g～0.5g 進行檢測。
5.2固體樣品（毒餌、米、面、茶葉、鹽、嘔吐物等）
取固體樣品（顆粒大的固體需先研磨碎）2g～5g 放入 10ml 比色管中，加入三倍于樣品重的蒸餾水或純凈水，振搖后過濾，將上清液用濾紙過濾，重復(fù)上述過程一次，合并上清液至一大試管內(nèi)，將比色管置于沸水浴中，使濾液煮沸濃縮至 1ml 左右。注意：不要將已經(jīng)揮發(fā)干的試管長時間置于沸水浴中，否則會影響回收率，出現(xiàn)假陰性。
5.3液體樣品（水、酒、飲料、醬油、醋等）
取液體樣品 5ml 放入大試管中，加入等量于樣品重的蒸餾水或純凈水，充分振蕩混勻，靜置 5min，用分液漏斗或滴管分離上清液，重復(fù)過程一次，合并上清液至大試管內(nèi)，將試管置于沸水浴中，使濾液煮沸濃縮至 1ml 左右。醬油、醋、有顏色的飲料等液體樣品使用少量活性炭或中性氧化鋁進行脫色處理，以防止顏色干擾。
6 樣品測定
取待檢液 1ml 左右于試管中，加氫氧化鈉溶液 10 滴，加鹽酸羥胺溶液 5 滴，置沸水中水浴 5min（使其充分水解成氟乙酸鈉釋放出氨）。取出放冷，加鹽酸溶液 9～10 滴（調(diào) pH 值至 3～5）后，加三氯化鐵溶液 3～10 滴（使其與氟乙酸反應(yīng)），取出觀察顏色變化。同時取一干凈的空試管進行同樣操作作為對照。
7 結(jié)果判定
陽性：粉紅或紫紅色，尤其在滴加后的液面上更為明顯。
陰性：淺黃或黃色。
8 說明
8.1加鹽酸溶液 9 滴后要用 pH 試紙測試溶液 pH 值，若 pH 值太高(堿度過高)，加入三氯化鐵溶液時可產(chǎn)生紅棕色沉淀，影響結(jié)果判定，造成假陽性結(jié)果；若 pH 值太低(酸度過高)，加入三氯化鐵溶液后氟乙酰胺顯色不敏銳或不顯色，易造成假陰性結(jié)果。pH 值可用氫氧化鈉溶液和鹽酸溶液反向調(diào)整。
8.2空白對照試驗，取與樣品相同（不含氟乙酰胺）的物質(zhì)與樣品同時操作，以便于觀察對比。對于嘔吐物、胃內(nèi)容物等樣品，應(yīng)加陽性對照試驗。
8.3測定時做空白對照試驗，陰性結(jié)果為淺黃或黃色，有些空白對照為黃棕色絮狀沉淀，靜置后上層液變成無色或僅呈淺黃色。
8.4本方法不適于血液和組織器官樣品的測定。
8.5三氯化鐵溶液放置時間長時會有少量沉淀產(chǎn)生，須搖勻后使用。組合試劑的有效期為 1 年，陽性對照試驗無反應(yīng)時不可再用。0質(zhì)量控制檢測時，應(yīng)同時做陰性樣品及氟乙酰胺標(biāo)準(zhǔn)品。
附件 6
液液萃取/氣相色譜氮磷檢測器法定量測定血漿中毒鼠強
1 適用范圍
用于定量測定血漿樣品中毒鼠強。
2 原理
使用液液萃取對樣品前進行前處理，然后將處理后樣品定容，并經(jīng)過毛細(xì)管柱分離，使用氮磷檢測器對其中組分毒鼠強進行測定，通過毒鼠強標(biāo)準(zhǔn)品的保留時間以及標(biāo)準(zhǔn)曲線來進行定性和定量檢測。
3 方法重要參數(shù)
3.1線性范圍：可對血漿中毒鼠強含量在 10ng/ml～500ng/ml 的樣品進行毒鼠強定量測定。
3.2精密度：批內(nèi)、批間 RSD≤10%。
3.3準(zhǔn)確度（回收率）：90%～110%。
3.4檢出限：*低定量濃度為 10ng/ml。
3.5全程測定時間：120min。
4 器材與試劑
氣相色譜儀（配置氮磷檢測器）；非極性毛細(xì)管氣相色譜柱（HP-1）；振蕩儀；離心機；微量加樣器；吹氮儀毒鼠強標(biāo)準(zhǔn)；乙酸乙酯
5 操作步驟
5.1色譜條件
a) 色譜柱：HP-1 交聯(lián)石英毛細(xì)管柱 30m×0.32mm i.d.×0.25μm。
b) 溫度：進樣口 250℃，檢測器 250℃。程序升溫：初始溫度150℃，保持 1min，以 7℃/min 的速率升溫至 250℃，保持 1min。
c) 載氣：高純氮氣，柱頭壓力 35kPa，不分流進樣，分流時間0.75min，隔墊清掃：3.6ml/min。尾吹流量：30ml/min。氫氣流量：3.3ml/min?？諝饬髁浚?6ml/min。
5.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的配制
稱取 100mg 毒鼠強標(biāo)準(zhǔn)，用乙酸乙酯在 100ml 容量瓶中定容，配制成 1mg/ml 的毒鼠強儲備液。用儲備液稀釋出 5μg/ml、2μg/ml、1μg/ml、0.5μg/ml、0.2μg/ml 和 0.1μg/ml 的標(biāo)準(zhǔn)溶液，利用此系列標(biāo)準(zhǔn)溶液繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，相關(guān)系數(shù)為 0.999。
5.3樣品前處理
取出 1ml 血漿樣品放入試管中，加入 2ml 乙酸乙酯，石蠟?zāi)し饪?，振蕩混?4min（如果乳化現(xiàn)象比較嚴(yán)重，可以加入 0.5ml 的異丙醇），3000rpm 離心 4min，將上清液取出，重復(fù)上述萃取過程一次，將兩次上清液合并。合并的上清液在 40℃水浴下吹氮至近干，加入 0.1ml乙酸乙酯定容，振蕩混勻 1min。
5.4 進樣檢測
取定容后的溶液 1μl 進樣檢測，保留時間定性，峰面積定量。
6質(zhì)量控制
6.1空白對照樣色譜圖上沒有保留時間與毒鼠強相同的峰。
6.2進待測樣品前必須進空白樣或乙酸乙酯溶劑，以確認(rèn)進樣針和色譜儀器系統(tǒng)未受污染。
6.3 質(zhì)控樣測得值應(yīng)在質(zhì)控樣品濃度的 90%～110%之間。
附件 7
液液萃取/氣相色譜氮磷檢測器法定量分析食品、血和尿樣品中氟乙酰胺和毒鼠強
1 適用范圍
用于定量測定食品、血和尿樣品中毒鼠強和氟乙酰胺。
2 原理
使用液液萃取對樣品前進行前處理，然后將處理后樣品定容，并經(jīng)過毛細(xì)管柱分離，氮磷檢測器對其中組分氟乙酰胺和毒鼠強進行測定，通過氟乙酰胺、毒鼠強標(biāo)準(zhǔn)品的保留時間以及標(biāo)準(zhǔn)曲線來進行定性和定量檢測。
3 方法重要參數(shù)
3.1線性范圍：(5～50)μg/ml。
3.2精密度：批內(nèi)、批間 RSD≤10%。
3.3準(zhǔn)確度（回收率）：80%～90%。
3.4全程測定時間：120min。
4 器材與試劑
氣相色譜儀（配置氮磷檢測器)；非極性毛細(xì)管氣相色譜柱（HP-1）；振蕩儀；離心機；微量加樣器；吹氮儀毒鼠強標(biāo)準(zhǔn)、氟乙酰胺標(biāo)準(zhǔn)
5 操作步驟
5.1色譜條件
a) 色譜柱：HP-1 交聯(lián)石英毛細(xì)管柱 30m×0.32mm i.d.×0.25μm。
b) NPD檢測器溫度:280℃,進樣口溫度:230℃,載氣恒流模式0.7ml/min, 空氣流量:60ml/min,氫氣:3ml/min。程序升溫:初始溫度150℃,保持2min,以10℃/min升溫至250℃,并保持5min。
5.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的配制
吸取1.0mg/ml的氟乙酰胺、毒鼠強標(biāo)準(zhǔn)溶液1.0ml于10.0ml容量瓶中,用乙酸乙酯定容至刻度,此液氟乙酰胺、毒鼠強的含量分別為100μg/ml,將混合標(biāo)準(zhǔn)液逐級稀釋為5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、50μg/ml,分別取1.0μg注入氣相色譜儀測定,以保留時間定性確證。氟乙酰胺和毒鼠強的保留時間分別為2.36min和8.72min左右。
5.3樣品前處理
5.3.1固體(米、面、饅頭、蔬菜等)
取適量樣品(15～30)g,加無水硫酸鈉研磨呈粉末狀,置于150ml帶塞錐形瓶中,加入50ml乙酸乙酯,用超聲波清洗器提取20min或振蕩1h過濾,濾液于40℃水浴濃縮至1ml～2ml。
5.3.2 飯、菜汁、洗胃液、嘔吐物等取適量樣品(15～20)g置于錐形瓶中,加50ml 乙酸乙酯,超聲提取或振蕩,乙酸乙酯層通過無水硫酸鈉過濾,于水浴濃縮至1ml～2ml。
5.3.3 病人血清、尿液取適量樣液(血清0.50ml,尿液500μl)于具塞離心管中,加5ml乙酸乙酯,振搖提取3min,于3500rpm/min下離心分層,水相再次用5ml乙酸乙酯萃取1次,合并2次萃取的有機相,濃縮至0.5ml。吸取1.0μL進行色譜儀分析。保留時間定性，峰面積定量。
6質(zhì)量控制
6.1空白對照樣色譜圖上沒有保留時間與氟乙酰胺和毒鼠強相同的峰。
6.2進待測樣品前必須進空白樣或乙酸乙酯溶劑，以確認(rèn)進樣針和色譜儀器系統(tǒng)未受污染。
6.3樣品分析則在相同檢測條件下,如在相同保留時間出現(xiàn)色譜峰,
可進一步在樣液中加入定量標(biāo)準(zhǔn)液,同一保留時間出現(xiàn)峰疊加即可判
定為陽性結(jié)果。
